我院研究生在《Analytica Chimica Acta》發(fā)表最新研究成果
近期，我院2020級臨床檢驗診斷學(xué)碩士研究生曾源遠 （論文第一作者，導(dǎo)師：何洋教授）在病毒分子診斷研究領(lǐng)域取得新進展，建立了一種高靈敏的氧化石墨烯（GO）-Multiplex qPCR 檢測系統(tǒng)，提高了SARS-CoV-2核酸檢測的靈敏度，以用于低病毒載量樣本的檢測。相關(guān)研究成果以High sensitivity SARS-CoV-2 detection using graphene oxide-multiplex qPCR為題發(fā)表于《Analytica Chimica Acta》雜志（影響因子6.911）。
SARS-CoV-2檢測的金標準是逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反應(yīng)，也是目前臨床應(yīng)用最為廣泛的檢測方法。然而，由于各種原因?qū)е聵颖局胁《据d量過低時，該方法在臨床實踐中顯示出大量假陰性結(jié)果，應(yīng)予以高度警惕。因此，本研究利用GO對Multiplex qPCR進行改進，開發(fā)了高靈敏度的SARS-CoV-2核酸檢測系統(tǒng)。
在該檢測系統(tǒng)中，GO-正向引物復(fù)合體可以吸引了自由的單鏈模板和反向引物到復(fù)合體的GO片層表面。在退火時，模板與引物配對，形成雙鏈結(jié)構(gòu)。而GO對雙鏈DNA的親和力很低，所以GO表面的正向引物會被釋放出來，并將其限制在GO片層之間，誘使目標基因在GO片層之間延伸。這種反應(yīng)模式增加了引物-模板碰撞的機會，使之更容易形成擴增子，從而提高了目標基因的擴增效率。相較于常規(guī)的Multiplex qPCR，GO-Multiplex qPCR的檢測限降低了10倍，為10拷貝/反應(yīng)。因此，GO-Multiplex qPCR 檢測系統(tǒng)為SARS-CoV-2的檢測提供了一種新型的技術(shù)方案。
圖GO-正向引物復(fù)合體在GO-Multiplex qPCR中的工作原理圖示
Figure Graphical representation of the working principle of GO-forward primer composites in GO-Multiplex qPCR.